無細(xì)胞蛋白合成（ CFPS ）技術(shù)憑借快速響應(yīng)、反應(yīng)體系開放、可編程性強(qiáng)等獨(dú)特優(yōu)勢(shì)，在 mRNA 翻譯研究、 高通量蛋白質(zhì)工程、體外診斷試劑研發(fā)、新型生物制劑制備等 領(lǐng)域具有重要應(yīng)用價(jià)值 。

近日，山東大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院李文斐團(tuán)隊(duì)在大腸桿菌無細(xì)胞蛋白合成（ e CFPS ）技術(shù)優(yōu)化方面取得進(jìn)展，成果以A simplified and highly efficient cell-free protein synthesis system for prokaryotes為題發(fā)表于eLife。

傳統(tǒng) e CFPS 系統(tǒng)存在反應(yīng)組分復(fù)雜（需 35 種）、試劑成本高，各組分間潛在的抑制性相互作用還會(huì)影響反應(yīng)穩(wěn)定性，裂解液制備流程繁瑣（依賴 run-off 反應(yīng)和透析）等瓶頸，導(dǎo)致成本高、操作難、穩(wěn)定性不足。針對(duì)這一問題，團(tuán)隊(duì)通過 “ 雙重簡(jiǎn)化 ” 構(gòu)建高效 eCFPS 平臺(tái)：一是經(jīng)逐級(jí)篩選，將核心必需組分精簡(jiǎn)至 7 種，顯著降低成本并消除組分間潛在抑制作用；二是開發(fā) “ 快速裂解液 ” 制備方案，省去耗時(shí)步驟，依托內(nèi)源代謝酶及殘余組分補(bǔ)償外源組分缺失，提升流程便捷性。

性能驗(yàn)證顯示，該簡(jiǎn)化體系翻譯質(zhì)量與魯棒性優(yōu)于傳統(tǒng)系統(tǒng)，成功合成固有毒性內(nèi)切酶 Bsa I 、易聚集的骨架蛋白 Vimentin （可自組裝為功能性纖維），展現(xiàn)出 對(duì) 復(fù)雜蛋白 的 合成能力。該突破降低了 CFPS 技術(shù)應(yīng)用門檻，為合成生物學(xué)研究及相關(guān)產(chǎn)業(yè)提供了高效可及的工具，相關(guān)成果已申請(qǐng)專利保護(hù)。

山東大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院博士生郎咸圣婕、博士后張長(zhǎng)斌為該研究共同第一作者，李文斐 、張哲 教授為 共同通 訊作者。 本 研究獲上?？萍即髮W(xué)李健 教授 團(tuán)隊(duì) 的 支持和幫助。

原文鏈接：https://elifesciences.org/reviewed-preprints/109495

李文斐團(tuán)隊(duì)聚焦 mRNA 翻譯調(diào)控及體外翻譯方法的研究，現(xiàn)與山東大學(xué)附屬兒童醫(yī)院郭磊院長(zhǎng)團(tuán)隊(duì)聯(lián)合招聘博士后，誠(chéng)邀對(duì)相關(guān)研究方向有熱情的伙伴加入。

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