CAR-T 細(xì)胞療法在血液腫瘤治療中成效顯著，但在實(shí)體瘤領(lǐng)域，免疫抑制性腫瘤微環(huán)境（ TME ）導(dǎo)致的療效受限、脫靶毒性等問題，成為臨床轉(zhuǎn)化的 主要 障礙。

近期 ，復(fù)旦大學(xué) 生物醫(yī)學(xué)研究院 徐建青、張曉燕 團(tuán)隊(duì)（復(fù)旦大學(xué)生物醫(yī)學(xué)研究院馮美琪為第一作者）在 Journal for ImmunoTherapy of Cancer 發(fā)表題為Harnessing tumor acidity: innovative lactic acid-responsive promoter enables precision control of CAR-T cell activity in solid tumors的研究論文。該研究創(chuàng)新性地將實(shí)體瘤標(biāo)志性代謝產(chǎn)物乳酸從免疫抑制因子轉(zhuǎn)化為腫瘤特異性激活信號(hào)，構(gòu)建出乳酸響應(yīng)型啟動(dòng)子（ LARP ）調(diào)控的CAR-T細(xì)胞（ LAR CAR-T ），該策略使CAR的表達(dá)在正常組織中處于“靜默”狀態(tài)，僅在進(jìn)入酸性腫瘤微環(huán)境時(shí)被“喚醒”，保證強(qiáng)效殺傷腫瘤的同時(shí)顯著降低脫靶毒性，為實(shí)體瘤免疫治療提供了兼具安全與效力的“精準(zhǔn)開關(guān)”。

從免疫抑制物到激活信號(hào)

實(shí)體瘤因異常糖酵解導(dǎo)致乳酸大量堆積，形成 pH6.0-6.9 的酸性微環(huán)境，既直接抑制 CAR-T 細(xì)胞殺傷、增殖功能，又參與構(gòu)建免疫抑制屏障；同時(shí)實(shí)體瘤缺乏絕對(duì)特異性抗原，腫瘤相關(guān)抗原在正常組織的低水平表達(dá)，讓傳統(tǒng) CAR-T 易引發(fā)嚴(yán)重脫靶毒性。此前針對(duì)乳酸的治療策略多聚焦于降低其濃度，卻存在補(bǔ)償代謝激活、正常組織毒性等問題，臨床轉(zhuǎn)化困難。

對(duì)此，研究團(tuán)隊(duì)另辟蹊徑，利用腫瘤 這一代謝特征 作為 CAR-T 細(xì)胞的 “ 開關(guān) ” 信號(hào)， 通過 RNA 測(cè)序篩選出對(duì)乳酸敏感的基因，最終鎖定硫氧還蛋白相互作用蛋白（ TXNIP ），并從中鑒定出核心的乳酸響應(yīng)元件 miniE ，構(gòu)建了長(zhǎng)度僅 180 bp 的 LARP 。

讓 CAR 表達(dá) “ 入瘤啟動(dòng)，出瘤靜默 ”

基于此啟動(dòng)子，團(tuán)隊(duì)構(gòu)建了靶向 HER2 的 LAR CAR-T 細(xì)胞。體外實(shí)驗(yàn)顯示：

(1) 表達(dá)依賴乳酸：在正常生理?xiàng)l件（無乳酸）下， LAR CAR 的表達(dá)水平僅為傳統(tǒng) CAR-T 細(xì)胞的 1/5 ，處于低活性狀態(tài)；當(dāng)暴露于模擬腫瘤微環(huán)境的乳酸（ 15-25 mM ）時(shí)，其 CAR 表達(dá)量可提升 2.5 倍以上，且這種上調(diào)是可逆的。

(2) 記憶表型富集： LAR CAR-T 細(xì)胞中，干細(xì)胞樣記憶 T 細(xì)胞（ TSCM ）的比例達(dá) 27.34% ，顯著高于傳統(tǒng) CAR-T 細(xì)胞的 9.86% ，為體內(nèi)長(zhǎng)期存活奠定基礎(chǔ)。

(3) 功能精準(zhǔn)切換：在酸性條件下， LAR CAR-T 的腫瘤殺傷效率提升至與傳統(tǒng) CAR-T 相當(dāng)?shù)乃?；而在中性條件下，其殺傷活性顯著降低，展現(xiàn)了酸性 TME 依賴的 “ 精準(zhǔn)打擊 ” 能力。

告別肝損傷，療效不打折

研究團(tuán)隊(duì)利用肝臟特異性表達(dá)人 HER2 抗原的人源化小鼠模型驗(yàn)證了 LAR CAR-T 的體內(nèi)安全性：傳統(tǒng) CAR-T 治療組小鼠在治療后迅速出現(xiàn)體重下降和死亡 ，伴隨嚴(yán)重肝損傷和大量促炎細(xì)胞因子釋放，肝臟出現(xiàn)嚴(yán)重炎癥浸潤(rùn)和結(jié)構(gòu)破壞； 而 LAR CAR-T 治療組小鼠不僅全部存活，體重穩(wěn)定，肝臟功能指標(biāo)和病理切片均未見明顯異常， 有效避免正常組織脫靶損傷。

在卵巢癌荷瘤小鼠模型中， LAR CAR-T 腫瘤抑制率達(dá) 69.98% ，與傳統(tǒng) CAR-T 抗腫瘤療效相當(dāng)，且能誘導(dǎo)長(zhǎng)效抗腫瘤免疫記憶，二次荷瘤仍可有效抑瘤。在進(jìn)一步建立的腫瘤和肝臟雙表達(dá) HER2 的臨床貼近模型中， LAR CAR-T 不僅實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤的完全清除，且僅引發(fā)了 一過性 肝酶升高，與傳統(tǒng) CAR-T 造成的持續(xù)高強(qiáng)度毒性形成鮮明對(duì)比 。

一個(gè) “ 代謝開關(guān) ” ，開啟精準(zhǔn)免疫治療新范式

該研究的核心創(chuàng)新在于，它重新定義了乳酸的角色 —— 從免疫抑制的 “ 免疫剎車 ” 轉(zhuǎn)變?yōu)榫珳?zhǔn)激活的 “ 免疫油門 ” 。

(1) 突破傳統(tǒng)局限：不同于以往需要針對(duì)每個(gè)抗原篩選 pH 敏感抗體的復(fù)雜策略， LARP 作為通用型 “ 代謝門控 ” ，不依賴于特定抗原，具有更廣的適配性。

(2) 增效不增毒：通過將 CAR-T 的強(qiáng)大殺傷力 “ 鎖 ” 在腫瘤內(nèi)部， 解決了實(shí)體瘤 CAR-T 治療療效和安全性兩大核心難題。

研究團(tuán)隊(duì)表示，未來計(jì)劃將 LARP 與缺氧響應(yīng)元件等結(jié)合，構(gòu)建 “ 雙鎖 ” 調(diào)控系統(tǒng)，進(jìn)一步提 升 特異性，并探索其在多種實(shí)體瘤及搭載其他治療性 “ 彈頭 ” （如雙特異性 T 細(xì)胞銜接器）中的應(yīng)用潛力。 這項(xiàng)研究為 CAR-T 療法從血液瘤邁向?qū)嶓w瘤開辟了一條 “ 精準(zhǔn)、安全 ” 的新路徑。

論文鏈接：https://jitc.bmj.com/content/14/2/e013672

制版人：十一

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