彎曲菌培養(yǎng)檢測試劑盒雙孔濾膜法方法說明

彎曲菌培養(yǎng)檢測試劑盒雙孔濾膜法使用說明書

作者：深圳市恒昊生物科技有限公司

連續(xù)：I73--I806--9I87

（用于家禽、家畜泄殖腔內(nèi)容物及糞便樣本）

【產(chǎn)品名稱】彎曲菌培養(yǎng)檢測試劑盒（雙孔濾膜法）

【包裝規(guī)格】

雙孔板濾膜檢測培養(yǎng)基（10 套／盒，內(nèi)徑 60mm）；彎曲菌樣本采集液（10*4ml／盒）；

彎曲菌樣本稀釋液（10*10ml／盒）；促生長增菌液（10*4ml／盒）

彎曲菌選擇性濾膜（20 片／盒）

注：雙孔板上蓋如有部分水汽，屬正?，F(xiàn)象，不影響使用；增菌液有些許紅色沉淀，屬正常現(xiàn)象，搖勻即可投入使用。

【預(yù)期用途】

彎曲菌是重要的人獸共患病原菌之一，可導(dǎo)致動物的流產(chǎn)、減產(chǎn)等。同時許多動物如雞、鴨、豬等是彎曲菌的主要儲存宿主。本分離方法主要適用于泄殖腔及糞便標(biāo)本中彎曲菌的分離、鑒定。

【檢驗原理】

本產(chǎn)品中的彎曲菌檢測雙孔濾膜培養(yǎng)基是基于彎曲菌的濾膜通透性的分離培養(yǎng)方法，利用細菌的形態(tài)及理化特征，以特異孔徑、特異通透性親水性的濾膜，替代彎曲菌的選擇性培養(yǎng)基，解決樣本中耐藥雜菌增高導(dǎo)致的彎曲菌檢測率降低的問題，樣本中彎曲菌的檢出率可達到 101CFU/ml。

【主要組成成份】

雙孔板濾膜檢測培養(yǎng)基：主要由 Clumbia 培養(yǎng)基、Karmali 培養(yǎng)基和無菌脫纖維兔血等組成。

糞便采集液：主要由腦心浸液等組成。

樣本稀釋液：主要由 PBS 緩沖液等組成。

增菌液：主要由脫纖維兔血、彎曲菌生長營養(yǎng)物等營養(yǎng)成分組成。

【貯存條件及保質(zhì)期】

產(chǎn)品于 2℃-8℃保存，切勿凍藏，增菌液需避光低溫保存，自生產(chǎn)之日起保質(zhì)期 3 個月。

【糞便標(biāo)本采集】

（1）采集糞便標(biāo)本（2 個豆粒大?。?，直接裝入彎曲菌樣本采集管中（含彎曲菌樣本采集液 4ml），4℃運回實驗室，當(dāng)天進行檢測。2ml 的混勻糞便采集液加入到促生長增菌液(4ml)中，充分混勻，置于微需氧環(huán)境下（5% O2、10% CO2和 85% N2）， 37℃或者 42℃增菌培養(yǎng) 24h；

（2）采集泄殖腔內(nèi)容物、肛拭子，將肛拭子直接放入促生長增菌液（4ml）中，充分混勻，4℃運回

實驗室，將促生長增菌液置于微需氧環(huán)境, 37℃或者 42℃增菌培養(yǎng) 24h；

【雙孔板濾膜法檢測方法】

將雙孔濾膜檢測試劑盒中的雙孔板取出，室溫平衡后，將無菌的濾膜輕輕貼在平板的中央表面（有網(wǎng)格面向上），注意不要產(chǎn)生氣泡（可用彎頭鑷子輕輕使膜與平板充分接觸），取增菌培養(yǎng)物或者混有標(biāo)本的樣本采集液 300ul，分成 4-6 點，均勻滴加于濾膜上，待水分充分透過濾膜后（約 45 min -60min）,輕輕揭去濾膜，翻轉(zhuǎn)平板于微需氧環(huán)境中 42℃或者 37℃,培養(yǎng) 36-48 h。生長于雙孔培養(yǎng)皿上的菌落多為彎曲菌單菌落，但仍需進一步核實鑒定，建議挑取單菌落進行彎

曲菌屬及屬內(nèi)不同菌種 PCR 鑒定。

【檢驗結(jié)果的解釋】

觀察菌落形態(tài)，統(tǒng)計細菌種類和菌落數(shù)量。正確的標(biāo)本采集是檢出細菌的基礎(chǔ)，所檢出細菌需經(jīng)鏡檢、生化鑒定來確認。

【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

1.培養(yǎng)基對質(zhì)控菌株培養(yǎng)生長率為 100%。

2.培養(yǎng)基對質(zhì)控菌株培養(yǎng)的重復(fù)性為 100%。

3.培養(yǎng)基對質(zhì)控菌株鑒定的批內(nèi)不精密度應(yīng)無差異。

4.培養(yǎng)基對質(zhì)控菌株鑒定的批間不精密度應(yīng)無差異。

【注意事項】

1.僅供科學(xué)研究使用。

2.全部樣本、微生物培養(yǎng)物和接種產(chǎn)品都應(yīng)該視為具有感染性的，而且應(yīng)該由受過訓(xùn)練的勝任的技術(shù)人員操作。在整個操作中，應(yīng)該遵循無菌操作技術(shù)和常規(guī)處理菌群的注意事項。

3.不要使用超過有效期及不符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定顏色的培養(yǎng)基。

4.使用前，將培養(yǎng)基從冰箱取出，使其達到室溫。

5.如出現(xiàn)平皿或玻璃瓶破損、變形或包裝損壞的情況，不要使用該培養(yǎng)基。

【生產(chǎn)批號及使用有效期】

見外包裝盒