第七章潔凈區(qū)的確認(rèn)和監(jiān)測

第一節(jié)潔凈區(qū)和空氣凈化設(shè)備確認(rèn)

第七十六條潔凈區(qū)和潔凈空氣設(shè)備（如單向流單元、RABS和隔離器）的設(shè)計必須符合相應(yīng)的潔凈度要求，包括達(dá)到“靜態(tài)”和“動態(tài)”的標(biāo)準(zhǔn)。應(yīng)當(dāng)按規(guī)范要求進行確認(rèn)，其確認(rèn)應(yīng)當(dāng)與環(huán)境監(jiān)測明確區(qū)分進行。

第七十七條潔凈室和潔凈空氣設(shè)備的確認(rèn)可以參考ISO 14644系列標(biāo)準(zhǔn)。確認(rèn)應(yīng)當(dāng)至少包括以下項目：

（一）過濾系統(tǒng)檢漏和完整性測試。

（二）風(fēng)量和風(fēng)速（1）。

（三）壓差檢測。

（四）氣流流型測試。

（五）懸浮粒子監(jiān)測。

（六）沉降菌、浮游菌和表面微生物檢測。

（七）溫度測量。

（八）相對濕度測試。

（九）泄漏測試。

（十）自凈測試。

注：（1）A級潔凈區(qū)應(yīng)當(dāng)進行風(fēng)速測試。其他級別潔凈區(qū)的風(fēng)速測試應(yīng)當(dāng)基于風(fēng)險評估決定，且在CCS中進行描述。用于最終滅菌產(chǎn)品灌裝的區(qū)域、作為A級和RABS背景的區(qū)域等，采用單向流送風(fēng)時需要進行風(fēng)速測試。對于非單向流的區(qū)域，可用自凈時間測試來代替風(fēng)速測試。

第七十八條潔凈區(qū)級別確認(rèn)是潔凈區(qū)確認(rèn)的一部分。潔凈區(qū)的級別確認(rèn)時應(yīng)當(dāng)分別測量≥0.5μm和≥5μm的顆粒的總數(shù)。測試需要在“靜態(tài)”和“動態(tài)”操作環(huán)境中進行。級別確認(rèn)活動應(yīng)當(dāng)避免對工藝或產(chǎn)品質(zhì)量造成任何影響。初始級別確認(rèn)建議在模擬操作期間進行，重新級別確認(rèn)建議在模擬操作期間或無菌工藝模擬試驗期間進行。

各潔凈級別懸浮粒子的標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定如下表：

級別

懸浮粒子數(shù)最高限度

≥0.5μm/m3

懸浮粒子數(shù)最高限度

≥5μm/m3

靜態(tài)

動態(tài)

靜態(tài)

動態(tài)

A

3520

3520

不作規(guī)定（1）

不作規(guī)定（1）

B

3520

不作規(guī)定（1）

2930

C

2930

D

不作統(tǒng)一規(guī)定（2）

不作統(tǒng)一規(guī)定（2）

注：（1）如有CCS或歷史趨勢數(shù)據(jù)依據(jù)，可考慮將≥5μm顆?？倲?shù)作為分級的參考標(biāo)準(zhǔn)。

（2）D級的動態(tài)限度不作統(tǒng)一規(guī)定。企業(yè)應(yīng)當(dāng)根據(jù)風(fēng)險評估和日常監(jiān)測的數(shù)據(jù)確定動態(tài)限度。

第七十九條潔凈區(qū)級別確認(rèn)時，測試取樣點位置及最低數(shù)量應(yīng)當(dāng)符合ISO 14644（第1部分）要求。對于無菌生產(chǎn)區(qū)及背景環(huán)境（即A級區(qū)和B級區(qū)），應(yīng)當(dāng)考慮增加額外的取樣點。應(yīng)當(dāng)根據(jù)生產(chǎn)操作的具體情況和風(fēng)險評估確定關(guān)鍵生產(chǎn)區(qū)的測試取樣點，評估應(yīng)當(dāng)包括灌裝點和膠塞加料盤等在內(nèi)的所有關(guān)鍵生產(chǎn)區(qū)域。

第八十條單向流系統(tǒng)的確認(rèn)方案應(yīng)當(dāng)明確送風(fēng)速度的測量要求（包括測量位置），其工作區(qū)域應(yīng)當(dāng)均勻送風(fēng)，風(fēng)速指導(dǎo)值為0.36—0.54m/s。單向流系統(tǒng)的氣流可視化研究應(yīng)當(dāng)與風(fēng)速測量相關(guān)聯(lián)。

第八十一條潔凈區(qū)確認(rèn)時應(yīng)當(dāng)對微生物進行測定。根據(jù)潔凈度級別、氣流可視化研究結(jié)果、生產(chǎn)操作情況以及風(fēng)險評估，確定取樣點的位置和數(shù)量。測試需要在靜態(tài)及動態(tài)操作環(huán)境中進行，采樣方法不應(yīng)當(dāng)對生產(chǎn)操作引入污染風(fēng)險。

各潔凈級別微生物監(jiān)測的標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定如下表：

級別

空氣采樣

CFU/m3

沉降碟（直徑90mm）

CFU/4小時（1）

接觸碟（直徑55mm）

CFU/碟

A

無生長

B

10

5

5

C

100

50

25

D

200

100

50

注：（1）沉降碟應(yīng)當(dāng)充分暴露在環(huán)境中，單個沉降碟的暴露時間不得多于4小時，同一位置可使用多個沉降碟連續(xù)進行監(jiān)測并累積計數(shù)。應(yīng)當(dāng)基于回收率研究確定單個沉降碟最長暴露時間，以防沉降碟培養(yǎng)基出現(xiàn)脫水干燥。

第八十二條潔凈室與潔凈空氣設(shè)備的再確認(rèn)應(yīng)當(dāng)根據(jù)規(guī)定的程序執(zhí)行，再確認(rèn)應(yīng)當(dāng)至少包括以下內(nèi)容：

（一）潔凈區(qū)級別確認(rèn)（懸浮粒子數(shù)）。

（二）終端過濾器的完整性。

（三）風(fēng)量測量。

（四）房間之間的壓差確認(rèn)。

（五）風(fēng)速測試。

第八十三條潔凈區(qū)應(yīng)當(dāng)定期進行再確認(rèn)。A級和B級再確認(rèn)的最長時間間隔為6個月。C級和D級再確認(rèn)的最長時間間隔為12個月。設(shè)備、設(shè)施、運行方式發(fā)生變更或潔凈區(qū)空調(diào)系統(tǒng)關(guān)閉重啟時，也應(yīng)當(dāng)適當(dāng)考慮進行再確認(rèn)。

第二節(jié)環(huán)境和人員監(jiān)測

第八十四條環(huán)境監(jiān)測是CCS的重要部分，用于監(jiān)測降低微生物和微粒污染風(fēng)險的控制措施。通常由以下元素組成：

（一）懸浮粒子數(shù)。

（二）微生物。

（三）溫度、相對濕度和其他監(jiān)測項目。

應(yīng)當(dāng)綜合考慮上述監(jiān)測結(jié)果，以確認(rèn)所監(jiān)測系統(tǒng)的設(shè)計、驗證和操作等是否符合要求。

第八十五條監(jiān)測結(jié)果應(yīng)當(dāng)用于日常批次放行、產(chǎn)品質(zhì)量回顧分析或調(diào)查。應(yīng)當(dāng)根據(jù)產(chǎn)品和工藝類型（最終滅菌工藝和無菌生產(chǎn)工藝）確定監(jiān)測結(jié)果對其影響的關(guān)鍵程度。

第八十六條應(yīng)當(dāng)結(jié)合CCS建立監(jiān)測規(guī)程，對懸浮粒子和微生物等進行監(jiān)測，并有相應(yīng)記錄，以達(dá)到以下目的：

（一）確保潔凈區(qū)或潔凈空氣設(shè)備按照其設(shè)計和法規(guī)要求持續(xù)提供符合要求的潔凈環(huán)境。

（二）能有效捕捉到環(huán)境偏離限度的情況，及時調(diào)查并評估產(chǎn)品質(zhì)量風(fēng)險。

第八十七條應(yīng)當(dāng)基于風(fēng)險評估建立環(huán)境監(jiān)測規(guī)程，確定取樣位置、監(jiān)測頻率、監(jiān)測方法，以及微生物的培養(yǎng)條件，取樣方法應(yīng)當(dāng)避免對生產(chǎn)活動造成污染。

風(fēng)險評估的因素包括工藝和產(chǎn)品知識、廠房、設(shè)備、操作步驟及其關(guān)鍵程度、級別確認(rèn)和日常監(jiān)測數(shù)據(jù)，以及環(huán)境中分離出的典型微生物等相關(guān)信息。關(guān)鍵區(qū)域監(jiān)測位置的風(fēng)險評估還應(yīng)當(dāng)考慮氣流可視化研究結(jié)果等。

風(fēng)險評估應(yīng)當(dāng)定期回顧，以確保環(huán)境監(jiān)測規(guī)程持續(xù)有效。

第八十八條潔凈區(qū)、潔凈空氣設(shè)備和人員的日常監(jiān)測應(yīng)當(dāng)在“動態(tài)”條件下進行，并貫穿關(guān)鍵操作的全過程，包括設(shè)備組裝操作。

第八十九條應(yīng)當(dāng)根據(jù)產(chǎn)品及操作的性質(zhì)制定溫度、相對濕度等參數(shù)，這些參數(shù)不應(yīng)當(dāng)對潔凈區(qū)（如A/B級）潔凈度造成不良影響。

第九十條A級潔凈區(qū)的監(jiān)測應(yīng)當(dāng)符合以下要求：

（一）應(yīng)當(dāng)能夠證明關(guān)鍵操作過程中始終符合無菌操作的環(huán)境條件要求。

（二）監(jiān)測位置應(yīng)當(dāng)包括所有對無菌設(shè)備表面、容器、密封件和產(chǎn)品具有高污染風(fēng)險的位置。

（三）監(jiān)測取樣點（包括取樣設(shè)備放置的位置、高度、朝向等）應(yīng)當(dāng)合理，以確保監(jiān)測結(jié)果可靠。

第九十一條應(yīng)當(dāng)制定適當(dāng)?shù)膽腋×Ｗ雍臀⑸锉O(jiān)測警戒限度和糾偏限度，并對持續(xù)監(jiān)測數(shù)據(jù)趨勢進行定期回顧。

應(yīng)當(dāng)制定文件明確規(guī)定監(jiān)測結(jié)果超標(biāo)時糾偏的詳細(xì)措施。應(yīng)當(dāng)調(diào)查監(jiān)測超標(biāo)的根本原因，并評估對產(chǎn)品（包括在數(shù)據(jù)監(jiān)測和報告期間生產(chǎn)的批次）的潛在影響。

本附錄規(guī)定了懸浮粒子和微生物監(jiān)測的最高糾偏限度，企業(yè)可以根據(jù)產(chǎn)品和操作性質(zhì)、監(jiān)測數(shù)據(jù)趨勢及CCS制定更嚴(yán)格的糾偏限度。

第九十二條應(yīng)當(dāng)制定文件明確規(guī)定趨勢分析的方法，趨勢分析應(yīng)當(dāng)至少包括：

（一）超出糾偏限度或警戒限度的次數(shù)增加。

（二）連續(xù)超出警戒限度。

（三）可能具有共同原因的、定期但孤立的超出糾偏限度（如總是在計劃的預(yù)防性維護之后出現(xiàn)單個點的偏離）。

（四）微生物類型、數(shù)量及優(yōu)勢菌群的變化。應(yīng)當(dāng)特別注意采集到的可能反映環(huán)境惡化或失控的微生物或難以控制的微生物（如形成孢子的微生物、霉菌）。

微生物種群、數(shù)量以及特定優(yōu)勢微生物的變化。應(yīng)當(dāng)特別注意采集到的可能反映環(huán)境失控、潔凈度惡化或難以控制的微生物（如形成孢子的微生物和霉菌）。

第九十三條各潔凈級別懸浮粒子環(huán)境監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)（最高糾偏限度）規(guī)定如下表：

級別

懸浮粒子數(shù)最高限度

≥0.5μm/m3

懸浮粒子數(shù)最高限度

≥5μm/m3

靜態(tài)

動態(tài)

靜態(tài)

動態(tài)

A

3520

3520

29

29

B

3520

29

2930

C

2930

D

不作統(tǒng)一規(guī)定（1）

不作統(tǒng)一規(guī)定（1）

注：（1）表中未規(guī)定D級動態(tài)監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)，企業(yè)應(yīng)當(dāng)基于風(fēng)險評估和日常監(jiān)測數(shù)據(jù)制定合適的動態(tài)監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)。

潔凈區(qū)的懸浮粒子在經(jīng)確認(rèn)的短暫“自凈”（自凈時間指導(dǎo)值：少于20分鐘）后，應(yīng)當(dāng)達(dá)到上表中的“靜態(tài)”標(biāo)準(zhǔn)。

由于電子噪聲、光散射、偶然損失等情況，A級區(qū)內(nèi)的粒子計數(shù)，有時會被判定為計數(shù)錯誤，尤其是當(dāng)量直徑≥5μm的粒子。然而，連續(xù)的或者有規(guī)律的計數(shù)發(fā)現(xiàn)低水平結(jié)果表明可能存在污染事件，應(yīng)當(dāng)進行調(diào)查。此類事件可能是空調(diào)送風(fēng)系統(tǒng)的早期故障、設(shè)備故障引起，也可能是設(shè)備組裝和不良常規(guī)操作所導(dǎo)致。

第九十四條在關(guān)鍵操作的全過程中，包括設(shè)備組裝操作，應(yīng)當(dāng)對A級潔凈區(qū)進行懸浮粒子持續(xù)監(jiān)測。

第九十五條A級潔凈區(qū)監(jiān)測的頻率及取樣量，應(yīng)當(dāng)能夠及時發(fā)現(xiàn)所有人為干預(yù)、偶發(fā)事件及任何系統(tǒng)的損壞。采樣流速應(yīng)當(dāng)達(dá)到28L/min（1ft3/min）以上，系統(tǒng)應(yīng)當(dāng)按一定頻率將單個結(jié)果與警戒限度和糾偏限度進行對比，頻率的設(shè)定應(yīng)當(dāng)能夠及時發(fā)現(xiàn)并反饋潛在的偏離情況，超過警戒限度應(yīng)當(dāng)觸發(fā)報警。操作規(guī)程應(yīng)當(dāng)詳細(xì)說明報警時應(yīng)當(dāng)采取的措施，包括考慮額外的微生物監(jiān)測。

第九十六條在B級潔凈區(qū)可采用與A級潔凈區(qū)相似的監(jiān)測方法?？筛鶕?jù)B級潔凈區(qū)對相鄰A級潔凈區(qū)的影響程度，調(diào)整采樣頻率和采樣量。

第九十七條應(yīng)當(dāng)對塵埃粒子計數(shù)器（包括采樣管）進行確認(rèn)。采樣管應(yīng)當(dāng)采用適宜的管徑和彎曲半徑，長度通常應(yīng)當(dāng)不超過1米，并盡量減少彎曲次數(shù)。在確認(rèn)級別時，應(yīng)當(dāng)使用采樣管較短的便攜式塵埃粒子計數(shù)器。在單向流系統(tǒng)中，應(yīng)當(dāng)采用等動力學(xué)取樣頭。取樣頭應(yīng)當(dāng)具有適當(dāng)?shù)某?，并盡可能地靠近關(guān)鍵位置，以確保采樣具有代表性。

【塵埃粒子計數(shù)器】

第九十八條當(dāng)生產(chǎn)操作中使用物料（如可能引起生物、化學(xué)或放射性危害的活生物、粉末狀產(chǎn)品或放射性藥物）可能對監(jiān)測產(chǎn)生影響時，應(yīng)當(dāng)考慮選擇適當(dāng)?shù)谋O(jiān)測方法。

第九十九條生產(chǎn)過程中的污染（如活生物、粉末狀產(chǎn)品或放射危害）可能損壞塵埃粒子計數(shù)器時，應(yīng)當(dāng)在設(shè)備調(diào)試操作和模擬操作期間進行測試。操作規(guī)程中應(yīng)當(dāng)明確規(guī)定模擬操作的執(zhí)行頻率。應(yīng)當(dāng)制訂合理的監(jiān)測頻率和策略，以證明暴露風(fēng)險前后的環(huán)境潔凈度。

第一百條使用自動化系統(tǒng)進行監(jiān)測時，采樣量通常取決于所用系統(tǒng)的采樣速率。日常監(jiān)測的采樣量可與潔凈級別確認(rèn)時的空氣采樣量不同，操作規(guī)程中應(yīng)當(dāng)詳細(xì)說明監(jiān)測采樣量。

第一百零一條應(yīng)當(dāng)對微生物進行動態(tài)監(jiān)測，評估無菌生產(chǎn)的微生物狀況。監(jiān)測方法有沉降菌法、定量空氣浮游菌采樣法和表面取樣法（如棉簽擦拭法、接觸碟法）等。動態(tài)取樣應(yīng)當(dāng)避免對A級、B級氣流流型造成不利影響。對表面和操作人員的監(jiān)測，應(yīng)當(dāng)在操作完成后進行。

【浮游菌采樣器】

微生物動態(tài)監(jiān)測應(yīng)當(dāng)貫穿于產(chǎn)品可能會受到污染的關(guān)鍵操作過程（如無菌組裝、無菌操作、灌裝、凍干上料等）。

第一百零二條各潔凈級別微生物動態(tài)監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)（最高糾偏限度）如下：

級別

浮游菌

CFU/m3

沉降菌（90mm）

CFU/4小時（1）

表面微生物

接觸（55mm）

CFU/碟（2）

5指手套

CFU/手套

A

無生長（3）

B

10

5

5

5

C

100

50

25

D

200

100

50

注：（1）當(dāng)采用沉降菌采樣法對A級和B級區(qū)進行監(jiān)測時，應(yīng)當(dāng)貫穿操作全過程（包括設(shè)備組裝操作）。沉降碟應(yīng)當(dāng)充分暴露在環(huán)境中，單個沉降碟的暴露時間不得多于4小時，同一位置可使用多個沉降碟連續(xù)進行監(jiān)測并累積計數(shù)。應(yīng)當(dāng)基于回收率研究等驗證結(jié)果確定單個沉降碟最長暴露時間，以防對所用培養(yǎng)基適用性產(chǎn)生不利影響。

應(yīng)當(dāng)通過質(zhì)量風(fēng)險管理確定C/D級潔凈區(qū)監(jiān)測的沉降碟暴露時間（最長4小時）以及采樣頻率。

（2）接觸碟限度適用于A級和B級區(qū)內(nèi)的設(shè)備、房間和潔凈服表面監(jiān)測。

（3）特別需要注意的是，A級區(qū)出現(xiàn)的任何長菌均應(yīng)當(dāng)進行調(diào)查。

第一百零三條在關(guān)鍵操作的全過程中，包括設(shè)備組裝操作，應(yīng)當(dāng)對A級潔凈區(qū)進行連續(xù)微生物監(jiān)測（如浮游菌或沉降菌采樣）。應(yīng)當(dāng)基于無菌工藝的風(fēng)險考慮是否在B級使用類似的方式進行監(jiān)測。監(jiān)測應(yīng)當(dāng)能夠捕獲所有干預(yù)、瞬時事件和任何的系統(tǒng)惡化，并應(yīng)當(dāng)避免任何由監(jiān)測操作造成的風(fēng)險。

第一百零四條未進行生產(chǎn)的潔凈區(qū)(如消毒后、生產(chǎn)前、批次生產(chǎn)結(jié)束后)，及未使用的相關(guān)區(qū)域，也應(yīng)當(dāng)進行微生物監(jiān)測，以識別可能影響潔凈室控制的潛在污染事件。如出現(xiàn)污染，可增加取樣監(jiān)測以確認(rèn)糾正措施(如清潔和消毒)的有效性。

第一百零五條應(yīng)當(dāng)對A級、B級潔凈區(qū)人員進行微生物監(jiān)測。根據(jù)人員活動情況、與關(guān)鍵區(qū)域的接近程度，以及風(fēng)險評估結(jié)果，確定人員監(jiān)測的位置、類型和頻率。操作過程中應(yīng)當(dāng)以適當(dāng)時間間隔對人員進行采樣，采樣方式應(yīng)當(dāng)避免對操作產(chǎn)生不利影響。人員監(jiān)測應(yīng)當(dāng)特別關(guān)注以下方面：

（一）人員進行關(guān)鍵干預(yù)操作后，應(yīng)當(dāng)對其手套進行取樣。應(yīng)當(dāng)根據(jù)關(guān)鍵干預(yù)操作的具體情況確定是否對潔凈服進行取樣，并按規(guī)定執(zhí)行。

（二）人員退出B級潔凈區(qū)時，應(yīng)當(dāng)對手套和潔凈服進行取樣。

（三）如關(guān)鍵干預(yù)后進行了手套取樣，應(yīng)當(dāng)在繼續(xù)操作之前更換外層手套。如關(guān)鍵干預(yù)后進行了潔凈服取樣，則應(yīng)當(dāng)在進一步活動之前更換潔凈服。

第一百零六條當(dāng)采用人工操作（如無菌配制或灌裝）的生產(chǎn)方式時，應(yīng)當(dāng)加強對A級、B級潔凈區(qū)人員潔凈服的微生物監(jiān)測，并在CCS中予以說明。

第一百零七條如日常監(jiān)測由生產(chǎn)人員進行，質(zhì)量部門人員應(yīng)當(dāng)進行監(jiān)督。

第一百零八條企業(yè)應(yīng)當(dāng)考慮采用合適的替代監(jiān)測系統(tǒng)（如快速方法）以加速發(fā)現(xiàn)微生物污染事件，降低產(chǎn)品風(fēng)險。此類快速自動化監(jiān)測方法應(yīng)當(dāng)經(jīng)驗證后使用，驗證應(yīng)當(dāng)證明與目前已建立的方法具有等效性或優(yōu)越性。

第一百零九條應(yīng)當(dāng)制定操作規(guī)程詳細(xì)說明微生物取樣方法、操作流程，以及監(jiān)測結(jié)果的正確判定。取樣方法應(yīng)當(dāng)有微生物回收率的支持性數(shù)據(jù)。

第一百一十條 A級或B級潔凈區(qū)檢測到的微生物應(yīng)當(dāng)鑒定到種，并應(yīng)當(dāng)評估微生物對產(chǎn)品質(zhì)量（涉及的所有批次）和總體控制狀態(tài)的潛在影響。

以下情形需考慮對C級和D級潔凈區(qū)檢測到的微生物進行鑒定：

（一）微生物監(jiān)測結(jié)果超過警戒限度或糾偏限度。

（二）分離出可能導(dǎo)致失控、潔凈度惡化的微生物。

（三）分離出難以控制的微生物（如形成孢子的微生物、霉菌）。

上述區(qū)域微生物鑒定頻次應(yīng)當(dāng)合理，以保證充分掌握潔凈區(qū)典型微生物情況。

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北京中邦興業(yè)科技有限公司成立于2011年，是國家級高新技術(shù)企業(yè)、北京市專精特新企業(yè)，專注于為生物制藥、半導(dǎo)體、新能源等高端行業(yè)提供潔凈環(huán)境整體解決方案。公司深度參與行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)建設(shè)，參編《GB/T25915.1-2021》等10項國家標(biāo)準(zhǔn)，持有ISO9001認(rèn)證及多項科技資質(zhì)。

核心業(yè)務(wù)涵蓋四大領(lǐng)域：

1）高端潔凈檢測設(shè)備全鏈服務(wù)，代理美國LIGHTHOUSE、AP、GTI等國際品牌，主營粒子計數(shù)器、浮游菌監(jiān)測系統(tǒng)等尖端儀器研發(fā)銷售及租賃；

2）儀器全生命周期管理，配備百級潔凈實驗室，提供校準(zhǔn)、維修、以舊換新等增值服務(wù)；

3）專業(yè)驗證檢測服務(wù)，組建GMP/ISO法規(guī)專家團隊，為制藥電子行業(yè)提供合規(guī)驗證方案；

4）潔凈環(huán)境在線監(jiān)測系統(tǒng)集成，依托專業(yè)施工團隊打造粒子、溫濕度、壓差等多參數(shù)智能監(jiān)控體系。

深耕行業(yè)十余年，公司已服務(wù)數(shù)百家知名企業(yè)，成功交付超千個潔凈工程項目，持續(xù)為高端制造領(lǐng)域創(chuàng)造潔凈價值。