慢性腎病患者的“噩夢”——腎纖維化，終于有了新的治療靶點線索！近日，解放軍總醫(yī)院兒科醫(yī)學(xué)部主任周輝霞教授團(tuán)隊與泌尿外科學(xué)部主任張旭院士合作，在國際期刊《Protein & Cell》上以封面文章形式發(fā)表了題為 “Neutrophil extracellular traps license macrophage production of chemokines to facilitate CD8+ T cell infiltration in obstruction-induced renal fibrosis”的 研究論文，該研究揭示了中性粒細(xì)胞外誘捕網(wǎng)（NETs）介導(dǎo)先天免疫與適應(yīng)性免疫協(xié)同作用從而促進(jìn)梗阻性腎病腎纖維化的新機制。

論文共同通訊作者：解放軍總醫(yī)院第三醫(yī)學(xué)中心泌尿外科醫(yī)學(xué)部主任張旭院士、解放軍總醫(yī)院第七醫(yī)學(xué)中心兒科醫(yī)學(xué)部主任周輝霞教授、陶元東主治醫(yī)師；論文共同第一作者：解放軍總醫(yī)院第七醫(yī)學(xué)中心兒童泌尿外科賈紅帥博士、岳光碩士和李品副主任醫(yī)師。

PART 01

進(jìn)行性腎纖維化是先天性梗阻性腎病的治療瓶頸

先天性梗阻性腎病是指因胎兒期或新生兒期尿路結(jié)構(gòu)異常導(dǎo)致尿流受阻，進(jìn)而引起腎積水、腎臟受壓及進(jìn)行性腎功能損害的一類疾病，其核心病理特征包括腎小管損傷、慢性炎癥反應(yīng)和腎間質(zhì)纖維化，常見病因為腎盂輸尿管連接部梗阻和后尿道瓣膜等。先天性梗阻性腎病是兒童慢性腎臟病和終末期腎病的主要病因之一，約占兒童腎移植病例的15.3%。目前以手術(shù)矯正為主的標(biāo)準(zhǔn)治療方案雖能解除解剖梗阻，卻難以逆轉(zhuǎn)已啟動的纖維化進(jìn)程。解析驅(qū)動纖維化持續(xù)進(jìn)展的核心細(xì)胞與分子機制，將有助于發(fā)現(xiàn)疾病干預(yù)的全新靶點。

PART 02

NETs是先天性梗阻性腎病腎纖維化的驅(qū)動因子

周輝霞教授團(tuán)隊長期以來聚焦小兒泌尿系統(tǒng)疾病的臨床與基礎(chǔ)研究。此前，團(tuán)隊通過繪制兒童先天性梗阻性腎病蛋白質(zhì)組學(xué)圖譜，揭示了該疾病的分子規(guī)律（Molecular Cellular Proteomics，2023）?；诘鞍踪|(zhì)組學(xué)提示，團(tuán)隊研究發(fā)現(xiàn)中性粒細(xì)胞外誘捕網(wǎng)（Neutrophil Extracellular Traps, NETs）通路在梗阻性腎臟中顯著富集。

實驗進(jìn)一步證實，NETs成分在患兒腎組織和外周血中顯著升高，其水平與梗阻腎臟的腎小球濾過率呈負(fù)相關(guān)。NETs是中性粒細(xì)胞釋放的包含DNA、顆粒酶等物質(zhì)的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，最初發(fā)現(xiàn)其在抵抗細(xì)菌感染過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。為證明NETs在梗阻性腎纖維化中的病理作用，團(tuán)隊采用基因敲除小鼠（PAD4 knockout）、藥物干預(yù)（DNase）降低NETs水平，發(fā)現(xiàn)腎纖維化和炎癥反應(yīng)顯著減輕；相反，NETs過繼轉(zhuǎn)移則加劇梗阻性腎纖維化和炎癥反應(yīng)。

這就實錘了：NETs是梗阻性腎纖維化發(fā)展的重要促進(jìn)因素！

PART 03

NETs是橋接先天免疫與適應(yīng)性免疫的樞紐

為闡明NETs促進(jìn)梗阻性腎纖維化的機制，團(tuán)隊運用轉(zhuǎn)錄組測序分析了野生型對照和PAD4敲除小鼠的腎組織，發(fā)現(xiàn)敲除PAD4能顯著降低細(xì)胞毒性T細(xì)胞相關(guān)基因的表達(dá)。流式細(xì)胞術(shù)分析進(jìn)一步證實，PAD4敲除后，梗阻腎臟中細(xì)胞毒性T細(xì)胞（Granzyme B+ CD8+ T細(xì)胞）的浸潤顯著減少；相反，NETs過繼轉(zhuǎn)移則可增加Granzyme B+ CD8+ T細(xì)胞的比例。此外，實驗表明CD8+ T細(xì)胞產(chǎn)生的顆粒酶B（Granzyme B）能顯著誘導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞發(fā)生上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（Epithelial-mesenchymal transition, EMT）并激活成纖維細(xì)胞，從而直接驅(qū)動腎纖維化進(jìn)程。

那么，NETs如何調(diào)控CD8+ T細(xì)胞的浸潤？

體外實驗表明：NETs并不能直接激活初始CD8+ T細(xì)胞，也不能誘導(dǎo)其增殖，提示NETs很可能調(diào)控了CD8+ T細(xì)胞的募集。

深入研究發(fā)現(xiàn)：NETs能顯著促進(jìn)巨噬細(xì)胞分泌T細(xì)胞關(guān)鍵趨化因子CXCL9、CXCL10及CXCL11。

機制研究表明：這一過程由TLR2/4信號通路介導(dǎo)。

上述結(jié)果證明NETs-巨噬細(xì)胞-T細(xì)胞炎性軸在梗阻性腎纖維化發(fā)展過程中具有重要作用。

NETs經(jīng)TLR2/4 信號通路增強巨噬細(xì)胞表達(dá)T細(xì)胞趨化因子CXCL9/10/11募集CD8+ T浸潤，CD8+ T細(xì)胞釋放GZMB通過促進(jìn)腎小管上皮細(xì)胞EMT以及成纖維細(xì)胞活化介導(dǎo)腎纖維化進(jìn)展。

PART 04

靶向NETs為疾病治療提供新思路

這項登上《Protein & Cell》封面的研究，不僅從炎癥角度深化了對先天性梗阻性腎病發(fā)病機制的認(rèn)識，更重要的是將NETs定位為連接先天免疫與適應(yīng)性免疫、驅(qū)動纖維化進(jìn)程的核心樞紐，揭示了復(fù)雜免疫細(xì)胞間相互作用在慢性腎臟病進(jìn)展中的重要作用。

本研究也提示，靶向NETs或其下游信號通路，有望成為阻斷梗阻性腎纖維化的全新治療策略，為改善患兒遠(yuǎn)期預(yù)后帶來了新希望。

主管| 解放軍總醫(yī)院政治工作部

主辦| 宣傳處融媒體中心

來源 | 第七醫(yī)學(xué)中心

圖文 | 賈紅帥 李品 沈曉麗 周珊聿

刊期 | 第 3036 期

總編：熊　剛

主編：晏 黎

編審：張　密　李笑一

編輯：李笑一