肝癌（Hepatocellular carcinoma, HCC）是全球發(fā)病率和死亡率極高的惡性腫瘤， 易早期 轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)【1】。轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1（TGF ? 1）是腫瘤微環(huán)境中富集的多效性細(xì)胞因子，可通過(guò)激活SMAD信號(hào)通路 ，誘導(dǎo) Snail、ZEB等轉(zhuǎn)錄因子 表達(dá)，進(jìn)而抑制 CDH1基因 轉(zhuǎn)錄，最終 促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移【7】。CDH1基因編碼 的 E-cadherin 蛋白 是維持上皮細(xì)胞間黏附的關(guān)鍵分子，其功能喪失與癌癥 轉(zhuǎn)移 密切相關(guān)【2】。 啟動(dòng)子區(qū)甲基化及 TGFβ1信號(hào)導(dǎo)致的CDH1基因轉(zhuǎn)錄抑制 ， 是沉默E-cadherin表達(dá)的常見(jiàn)機(jī)制。目前， CDH1穩(wěn)定性調(diào)控機(jī)制及其在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用 未知。

長(zhǎng)鏈非編碼RNA（lncRNAs）是一類(lèi)長(zhǎng)度大于500 個(gè)核苷酸 的 非 編碼RNA 分子 ，在多種生物學(xué)過(guò)程中發(fā)揮重要 的 調(diào)控作用【3】。 Alu 元件是靈長(zhǎng)類(lèi)基因組中含量最豐富的短散在重復(fù)序列（SINEs），約占人類(lèi)基因組的10%【4】，廣泛分布于mRNA的3'UTR 及 lncRNA【5】。盡管約25%的lncRNA含有Alu元件， 但 其功能 及 意義仍 有 待探索。

中山大學(xué)莊詩(shī)美教授 和朱穎副教授 團(tuán)隊(duì)此前研究發(fā)現(xiàn)，lnc-APUE（lncRNA accelerating proliferation by upregulating E2F1）在肝癌中表達(dá)上調(diào) ，通過(guò)結(jié)合 miR-20b ，解除其對(duì) E2F1 的抑制，從而驅(qū)動(dòng)細(xì)胞周期，促進(jìn)肝癌細(xì)胞增殖【8】。 近日，該 團(tuán)隊(duì)在Advanced Science雜志發(fā)表題為TGF?1 Activates Lnc-APUE to Promote Tumor Metastasis via the Alu Element-Driven STAU1-Mediated Decay of CDH1 mRNA的 研究論文 ，揭示了“TGF?1-SMAD-lnc-APUE-E-cadherin”調(diào)控軸在肝癌轉(zhuǎn)移中的關(guān)鍵作用，具體機(jī)制為：TGF?1通過(guò)激活SMAD信號(hào)通路上調(diào)lnc-APUE的表達(dá)；lnc-APUE則通過(guò)其Alu元件與CDH1 mRNA 3'UTR上的Alu序列配對(duì)，進(jìn)而招募STAU1和UPF1形成復(fù)合物，誘發(fā)CDH1 mRNA的降解，最終導(dǎo)致E-cadherin蛋白水平降低，驅(qū)動(dòng)肝癌轉(zhuǎn)移。

該研究的 核心發(fā)現(xiàn) ：

1. Lnc-APUE通過(guò) Alu 元件與CDH1 3'UTR 上的 Alu 元件配對(duì) 并 降低CDH1表達(dá)

生物信息學(xué)篩選發(fā)現(xiàn)，lnc-APUE 序列 含有一個(gè) Alu 元件（290-402 nt），可與CDH1 mRNA 3'UTR中的 Alu 元件（893-1006 nt）形成高度互補(bǔ)配對(duì)（ΔG = -105.24 kcal/mol）。RNA-RNA電泳遷移率變動(dòng)分析（EMSA）證實(shí) 兩者可 形成穩(wěn)定的RNA雙鏈結(jié)構(gòu)，而突變lnc-APUE的 Alu 序列則破壞這一相互作用。

敲低lnc-APUE顯著上調(diào)肝癌細(xì)胞中CDH1 mRNA和E-cadherin蛋白水平，而過(guò)表達(dá)lnc-APUE則產(chǎn)生相反效果。雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)和S1m標(biāo)簽RNA親和純化實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)，lnc-APUE通過(guò)其 Alu 元件直接結(jié)合CDH1 mRNA 3'UTR，且 Alu 元件缺失或突變均可 消除 lnc-APUE對(duì)CDH1表達(dá)的調(diào)控作用。

2. Lnc-APUE 通過(guò) 激活SMD （ STAU1-mediated mRNA decay ） 途徑促進(jìn)CDH1 mRNA降解

機(jī)制研究表明，lnc-APUE與CDH1 mRNA的 Alu:Alu 配對(duì)形成了STAU1結(jié)合位點(diǎn)（STAU1-binding site, SBS）。RNA免疫沉淀（RIP）實(shí)驗(yàn)顯示，STAU1可同時(shí)結(jié)合lnc-APUE和CDH1 3'UTR，而敲低lnc-APUE顯著削弱STAU1與CDH1 3'UTR的相互作用。敲低SMD途徑關(guān)鍵組分STAU1或UPF1可延長(zhǎng)CDH1 mRNA半衰期并上調(diào)其水平，且能阻斷l(xiāng)nc-APUE過(guò)表達(dá)對(duì)CDH1表達(dá)的下調(diào)作用。這些結(jié)果表明，lnc-APUE通過(guò) Alu 元件依賴的SMD途徑 降低 CDH1 mRNA 水平 。

3. Lnc-APUE - E-cadherin軸促進(jìn)肝癌細(xì)胞遷移和侵襲

功能獲得和缺失結(jié)果表明， lnc-APUE在體內(nèi)外均能增強(qiáng)肝癌細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移能力。同時(shí)，敲低E-cadherin可挽救lnc-APUE敲低對(duì)細(xì)胞遷移的抑制作用，證實(shí)lnc-APUE通過(guò)下調(diào)E-cadherin促進(jìn)轉(zhuǎn)移。此外， Alu 元件缺失或突變的lnc-APUE無(wú)法促進(jìn) 癌 細(xì)胞遷移，STAU1敲低也能阻斷l(xiāng)nc-APUE的促遷移作用，證明 Alu 元件和SMD途徑對(duì)lnc-APUE的促轉(zhuǎn)移功能至關(guān)重要。

4. TGF ? 1/SMAD信號(hào)通路上調(diào)lnc-APUE轉(zhuǎn)錄

研究團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)，TGF ? 1處理以時(shí)間和劑量依賴的方式顯著上調(diào)lnc-APUE表達(dá)。通過(guò)啟動(dòng)子截短和突變分析，鑒定出lnc-APUE啟動(dòng)子-505至-212 bp區(qū)域含有兩個(gè)功能性SMAD結(jié)合元件。染色質(zhì)免疫沉淀（ChIP）實(shí)驗(yàn)證實(shí)，TGF ? 1刺激可誘導(dǎo)SMAD2 活化并 直接結(jié)合lnc-APUE啟動(dòng)子。 而且 抑制TGFBR1或敲低SMAD2/3/4均可阻斷TGF ? 1對(duì)lnc-APUE的上調(diào)作用。功能 研究揭示 ，敲低lnc-APUE可阻斷TGF ? 1誘導(dǎo)的E-cadherin下調(diào)以及細(xì)胞遷移和侵襲，表明lnc-APUE是TGF ? 1信號(hào)通路的關(guān)鍵下游效應(yīng)分子。

上述研究發(fā)現(xiàn) 揭示 了 Alu 元件 是 lncRNA 發(fā)揮功能 的 關(guān)鍵結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)，并闡明了由此介導(dǎo)的E-cadherin下調(diào)及肝癌轉(zhuǎn)移的新機(jī)制，為抗癌治療提供了新靶點(diǎn)。尤其值得關(guān)注的是 靶向lnc-APUE或其Alu元件有望同時(shí)抑制腫瘤的生長(zhǎng)與擴(kuò)散， 可能實(shí)現(xiàn) “一石二鳥(niǎo)” 的治療效果 。

中山大學(xué)莊詩(shī)美教授和朱穎 副 教授為本論文的共同通訊 作者 ，李 頌揚(yáng) 博士和黃 嘉惠博士 為共同第一作者。

原文鏈接：https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/41632098/

制版人：十一

參考文獻(xiàn)

[ 1 ] Yang C, Zhang H L, Zhang L M, et al. Evolving therapeutic landscape of advanced hepatocellular carcinoma .Nature Reviews Gastroenterology & Hepatology, ( 2023 ), 20 (4): 203-222.

[ 2 ] H. Nakagawa, Y. Hikiba, Y. Hirata, et al., “Loss of Liver E-Cadherin Induces Sclerosing Cholangitis and Promotes Carcinogenesis,”Proceed-ingsof the National Academy of Sciences111 (2014): 1090–1095.

[ 3 ] J. Ferrer and N. Dimitrova, “Transcription regulation by long non-coding RNAs: mechanisms and disease relevance,”Nature Reviews Molecular Cell Biology25 (2024): 396–415.

[4] K. Lee, J. Ku, D. Ku, and Y. Kim, “Inverted Alu Repeats: Friends or Foes in the human Transcriptome,”Experimental and Molecular Medicine56 (2024): 1250–1262.

[5] L. L. Chen and L. Yang, “ALUternative Regulation for Gene Expres-sion,”Trends in Cell Biology27 (2017): 480–490.

[6] C. T. Kureshi and S. K. Dougan, “Cytokines in Cancer,” Cancer Cell 43 (2025): 15–35.

[ 7 ] Li S Y, Zhu Y, Li R N, et al. LncRNA Lnc-APUE is Repressed by HNF4α and Promotes G1/S Phase Transition and Tumor Growth by Regulating MiR-20b/E2F1 Axis .Advanced Science, ( 2021 ), 8 (7).

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