一份詳盡的病毒檢測(cè)報(bào)告背后，是生物科技企業(yè)對(duì)細(xì)胞治療安全底線的堅(jiān)守。

在全球范圍內(nèi)，細(xì)胞治療領(lǐng)域正在以前所未有的速度發(fā)展。根據(jù)國(guó)際細(xì)胞與基因治療協(xié)會(huì)的數(shù)據(jù)，截至2024年底，全球已有超過(guò)2000項(xiàng)細(xì)胞治療臨床試驗(yàn)正在進(jìn)行中。

一項(xiàng)來(lái)自國(guó)家工程研究中心的權(quán)威公告：近日，國(guó)家藥監(jiān)局發(fā)布了《關(guān)于適用Q5A(R2):來(lái)源于人或動(dòng)物細(xì)胞系生物技術(shù)產(chǎn)品的病毒安全性評(píng)價(jià)》的指導(dǎo)原則，明確規(guī)范了生物技術(shù)產(chǎn)品的病毒安全性評(píng)價(jià)工作。

這一規(guī)定背后，是對(duì)歷史上多起生物制品病毒污染事件的深刻反思。

01 病毒來(lái)源

FDA在2024年的指南中明確指出，生產(chǎn)細(xì)胞和基因治療產(chǎn)品時(shí)使用的人源和動(dòng)物源材料可能引入包括病毒在內(nèi)的外源因子。

干細(xì)胞制劑中人源病毒的來(lái)源遠(yuǎn)比想象中復(fù)雜。這些潛在的病毒污染可能源自多個(gè)環(huán)節(jié)。

最直接的來(lái)源是供體本身，如果供體攜帶某些潛伏性病毒，如巨細(xì)胞病毒、EB病毒等，這些病毒可能隨著細(xì)胞一同進(jìn)入制備流程。

其次是制備過(guò)程中使用的各種生物材料，特別是傳統(tǒng)培養(yǎng)基中添加的血清成分。即使是經(jīng)過(guò)篩選的胎牛血清，也可能攜帶動(dòng)物源病毒，進(jìn)而污染細(xì)胞產(chǎn)品。而無(wú)血清培養(yǎng)基中添加的人血小板裂解物也是高風(fēng)險(xiǎn)的病毒污染來(lái)源。

此外，操作環(huán)境和人員也是不可忽視的污染源。在開放的操作環(huán)節(jié)中，環(huán)境中的微生物或操作人員攜帶的病毒可能意外引入。

這些潛在威脅的存在，使得干細(xì)胞制劑從制備之初就面臨著病毒污染的風(fēng)險(xiǎn)。

02 安全控制

病毒污染對(duì)干細(xì)胞制劑的安全性構(gòu)成嚴(yán)重威脅。歷史上曾有HIV病毒、乙肝病毒污染血液制品，并通過(guò)共用注射器導(dǎo)致疾病大規(guī)模傳播的惡性事件。

在細(xì)胞治療領(lǐng)域，病毒污染不僅可能導(dǎo)致產(chǎn)品安全性風(fēng)險(xiǎn)，在臨床上產(chǎn)生嚴(yán)重后果，還可能對(duì)生物制品的生產(chǎn)過(guò)程、環(huán)境和操作者帶來(lái)安全風(fēng)險(xiǎn)。

從監(jiān)管角度看，國(guó)家藥品監(jiān)督管理局藥品審評(píng)中心對(duì)藥物的工藝規(guī)范、監(jiān)督監(jiān)管提出了嚴(yán)格要求。2019年至2021年，NMPA發(fā)布的生物制品指導(dǎo)原則數(shù)量顯著增加，顯示出對(duì)此問(wèn)題的高度重視。2024年，中國(guó)國(guó)家藥監(jiān)局藥品審評(píng)中心進(jìn)一步強(qiáng)化了對(duì)細(xì)胞治療產(chǎn)品病毒安全性的審評(píng)要求，將病毒控制列為IND申報(bào)的核心審查項(xiàng)。

對(duì)于干細(xì)胞制劑而言，病毒安全性控制不僅關(guān)乎患者安全，也是產(chǎn)品能否通過(guò)審批、進(jìn)入臨床的關(guān)鍵因素。例如，某細(xì)胞龍頭企業(yè)的人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞注射液，在通過(guò)嚴(yán)格的病毒檢測(cè)后，才獲得國(guó)家藥監(jiān)局藥品評(píng)審中心的審批，進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段。這一教訓(xùn)凸顯了病毒控制在細(xì)胞治療產(chǎn)品開發(fā)中的關(guān)鍵地位。

03 檢測(cè)方法

干細(xì)胞制劑中人源病毒的檢測(cè)種類多樣，主要包括對(duì)引起免疫缺陷性疾病和肝炎的人源病毒檢測(cè)，如HIV、乙肝、丙肝等。

從檢測(cè)方法來(lái)看，目前常見的病毒檢測(cè)方法包括：

細(xì)胞培養(yǎng)法：如細(xì)胞培養(yǎng)直接觀察法、體外不同傳代細(xì)胞培養(yǎng)及血吸附/血凝試驗(yàn)。這類方法可以直接檢測(cè)活病毒的存在。

分子生物學(xué)方法：如聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)，可用于檢測(cè)特定病毒的核酸序列。熒光定量RT-PCR法能夠檢測(cè)HCV、HIV-1/2、HTLV-1/2等RNA病毒，靈敏度可達(dá)10～100拷貝/μL。

免疫學(xué)方法：如ELISA等，用于檢測(cè)病毒特異性抗原或抗體。

特定病毒檢測(cè)：包括特殊人源病毒檢測(cè)、牛源病毒檢測(cè)、豬細(xì)小病毒檢測(cè)、逆轉(zhuǎn)錄病毒檢測(cè)等。

隨著測(cè)序技術(shù)的發(fā)展，新一代測(cè)序技術(shù)為病毒檢測(cè)帶來(lái)了革命性突破。NGS技術(shù)能夠同時(shí)對(duì)數(shù)十萬(wàn)到數(shù)百萬(wàn)條DNA分子進(jìn)行序列測(cè)定，極大提高了檢測(cè)效率。

tNGS (靶向測(cè)序)可精準(zhǔn)鎖定預(yù)設(shè)病原體目標(biāo)，通過(guò)雜交捕獲或超高多重PCR靶向富集特定病原體序列。靈敏度高，可檢測(cè)低至1ng的DNA；工作流程可在24小時(shí)內(nèi)完成。

04 華辰策略

蘇州華辰生物基于對(duì)干細(xì)胞制劑安全性的深刻理解，構(gòu)建了一套多層次、全方位的病毒控制策略。

華辰方案真正的創(chuàng)新之處在于，將tNGS技術(shù)整合到了原料質(zhì)量控制的核心環(huán)節(jié)。

對(duì)于培養(yǎng)基中的關(guān)鍵重組人源蛋白原料和人血小板裂解物，華辰生物不僅依靠供應(yīng)商的合格證明，更是每一批次都送至獲得CNAS和CMA資質(zhì)的權(quán)威第三方實(shí)驗(yàn)室，進(jìn)行tNGS病毒篩查。

這種“靶向追蹤”式的檢測(cè)，能夠針對(duì)干細(xì)胞制備過(guò)程中最可能引入的病毒風(fēng)險(xiǎn)，進(jìn)行深度、精準(zhǔn)的掃描，確保即使極微量的病毒核酸也能被檢出。

華辰生物的tNGS檢測(cè)方案覆蓋了包括DNA病毒48種，RNA病毒75種與干細(xì)胞治療安全密切相關(guān)的病毒，檢測(cè)靈敏度達(dá)到行業(yè)領(lǐng)先水平。根據(jù)國(guó)際文獻(xiàn)，類似的NGS方法檢測(cè)病毒載量的結(jié)果與傳統(tǒng)金標(biāo)準(zhǔn)方法高度一致，平均差異僅在0.2-0.5 log10范圍內(nèi)。

公司還從源頭著手，自主研發(fā)了化學(xué)成分完全限定的無(wú)血清培養(yǎng)基，徹底消除了通過(guò)血清引入病毒的風(fēng)險(xiǎn)。與傳統(tǒng)的含血清培養(yǎng)基相比，這種培養(yǎng)基不僅提高了細(xì)胞培養(yǎng)的一致性，還避免了細(xì)胞通過(guò)內(nèi)吞作用攝取異種蛋白引發(fā)的潛在免疫反應(yīng)。

05 質(zhì)量承諾

華辰生物對(duì)病毒安全性的承諾不僅停留在技術(shù)層面，更體現(xiàn)在每一套出廠產(chǎn)品的質(zhì)量保證上。

與市場(chǎng)上多數(shù)干細(xì)胞培養(yǎng)基供應(yīng)商不同，華辰生物的每一套間充質(zhì)干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基都附帶由權(quán)威第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)出具的病毒檢測(cè)報(bào)告。

這份報(bào)告不僅是產(chǎn)品安全的證明，更是客戶進(jìn)行IND申報(bào)時(shí)的關(guān)鍵技術(shù)文件。

從監(jiān)管角度，NMPA在審評(píng)細(xì)胞治療產(chǎn)品時(shí)，特別關(guān)注原料的病毒安全性控制。擁有第三方檢測(cè)報(bào)告的培養(yǎng)基，能夠顯著簡(jiǎn)化IND申報(bào)中關(guān)于原料安全性的論證過(guò)程，為客戶節(jié)省寶貴的時(shí)間和資源。

這種“檢測(cè)報(bào)告隨產(chǎn)品”的模式，體現(xiàn)了華辰生物對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量的自信，也為下游細(xì)胞治療企業(yè)提供了實(shí)實(shí)在在的便利和價(jià)值。

在蘇州華辰生物的質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，技術(shù)人員正仔細(xì)審核最新一批培養(yǎng)基的tNGS檢測(cè)報(bào)告。屏幕上滾動(dòng)的數(shù)據(jù)，是超過(guò)20種病毒檢測(cè)的“全陰性”結(jié)果。

從傳統(tǒng)血清培養(yǎng)到化學(xué)成分限定的無(wú)血清培養(yǎng)，從單一病毒檢測(cè)到tNGS全面篩查，干細(xì)胞制備技術(shù)正在經(jīng)歷一場(chǎng)深刻的安全革命。

這份附在每一套培養(yǎng)基旁的檢測(cè)報(bào)告，不僅是一張紙，更是連接干細(xì)胞從實(shí)驗(yàn)室走向臨床的安全橋梁。

從傳統(tǒng)的血清培養(yǎng)到無(wú)血清培養(yǎng)，干細(xì)胞制備技術(shù)正在經(jīng)歷一場(chǎng)安全革命。而在這場(chǎng)革命中，嚴(yán)格的病毒控制策略和高品質(zhì)的培養(yǎng)基，是干細(xì)胞療法從實(shí)驗(yàn)室走向臨床的安全橋梁。