抑郁癥的臨床核心癥狀包括興趣缺失、快感缺乏及絕望行為。為在動(dòng)物模型中模擬這些癥狀，科學(xué)家建立了一系列行為學(xué)檢測(cè)范式。本研究方法描述了三種常用于評(píng)估大小鼠抑郁樣行為的實(shí)驗(yàn)：糖水偏好實(shí)驗(yàn)、強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)和懸尾實(shí)驗(yàn)。根據(jù)應(yīng)激程度最小化原則，建議實(shí)驗(yàn)順序?yàn)橄冗M(jìn)行非應(yīng)激性的糖水偏好實(shí)驗(yàn)，最后進(jìn)行高強(qiáng)度應(yīng)激的強(qiáng)迫游泳與懸尾實(shí)驗(yàn)。需特別注意，強(qiáng)迫游泳和懸尾實(shí)驗(yàn)不應(yīng)在同一天進(jìn)行，兩者間隔至少24小時(shí)。

1. 糖水偏好實(shí)驗(yàn)
糖水偏好實(shí)驗(yàn)用于檢測(cè)嚙齒類動(dòng)物的快感缺失，這是抑郁癥的核心癥狀之一。該實(shí)驗(yàn)利用動(dòng)物對(duì)甜味的天然偏好。

• 實(shí)驗(yàn)原理：在禁食或禁水一段時(shí)間后，同時(shí)給予動(dòng)物飲用水和低濃度蔗糖水。通過計(jì)算動(dòng)物對(duì)蔗糖水的偏好程度（蔗糖偏嗜度），來量化其快感反應(yīng)。

• 操作步驟：

1. 適應(yīng)期：動(dòng)物單籠飼養(yǎng)，進(jìn)行為期48小時(shí)的飲水訓(xùn)練。前24小時(shí)，每籠放置兩瓶均為2%的蔗糖水。后24小時(shí)，將其中一瓶替換為純水，期間交換一次水瓶位置以避免位置偏好。

2. 測(cè)試期：大鼠適應(yīng)期結(jié)束后，禁食禁水14-23小時(shí)，隨后進(jìn)行1小時(shí)的糖水偏好測(cè)試，測(cè)量并記錄蔗糖水瓶與純水瓶的消耗量（以克為單位）。小鼠則在訓(xùn)練期結(jié)束后，禁水（不禁食）9-18小時(shí)，進(jìn)行2小時(shí)的測(cè)試，期間交換一次水瓶位置。

評(píng)價(jià)指標(biāo)：以蔗糖偏嗜度為核心指標(biāo)進(jìn)行計(jì)算：蔗糖偏嗜度（%）= 蔗糖水飲用量 / (蔗糖水飲用量 + 純水飲用量) × 100%。與對(duì)照組相比，模型組動(dòng)物蔗糖偏嗜度顯著降低，則提示其出現(xiàn)了快感缺失樣行為。

2. 強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)
強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)是評(píng)估動(dòng)物“行為絕望”的經(jīng)典范式，廣泛用于抗抑郁藥物篩選和模型驗(yàn)證。

• 實(shí)驗(yàn)原理：將動(dòng)物置于一個(gè)局限且無法逃脫的充滿溫水的水環(huán)境中。嚙齒類動(dòng)物先天厭惡水，會(huì)先劇烈掙扎試圖逃脫，在發(fā)現(xiàn)逃脫無望后，會(huì)進(jìn)入一種漂浮不動(dòng)的“行為絕望”狀態(tài)。

• 操作步驟：

1. 環(huán)境準(zhǔn)備：調(diào)節(jié)水溫至23-25℃。水深需根據(jù)動(dòng)物體型調(diào)整，確保動(dòng)物尾部不能觸及缸底。

2. 大鼠實(shí)驗(yàn)：實(shí)驗(yàn)前24小時(shí)進(jìn)行一次預(yù)游（約15分鐘），以適應(yīng)環(huán)境。正式實(shí)驗(yàn)時(shí)，記錄5分鐘內(nèi)動(dòng)物的不動(dòng)時(shí)間、游泳時(shí)間及攀爬時(shí)間。

3. 小鼠實(shí)驗(yàn)：無需預(yù)游，直接進(jìn)行6分鐘測(cè)試，記錄后4分鐘內(nèi)的各項(xiàng)行為時(shí)間。若同時(shí)進(jìn)行多只動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，應(yīng)用不透明擋板隔開，避免相互干擾。

評(píng)價(jià)指標(biāo)：

• 不動(dòng)狀態(tài)：動(dòng)物僅做輕微肢體運(yùn)動(dòng)以維持頭部浮出水面，呈漂浮狀。不動(dòng)時(shí)間越長(zhǎng)，通常表明抑郁樣行為越嚴(yán)重。

• 游泳狀態(tài)：動(dòng)物四肢在水面下進(jìn)行協(xié)調(diào)劃水。

• 攀爬狀態(tài)：動(dòng)物前肢劇烈伸出水面，沿缸壁向上攀爬。攀爬和游泳時(shí)間的減少也與抑郁程度加重相關(guān)。

3. 懸尾實(shí)驗(yàn)
懸尾實(shí)驗(yàn)是另一種評(píng)估“行為絕望”的常用方法，主要適用于小鼠。

強(qiáng)迫游泳/懸尾實(shí)驗(yàn)方法，XR-XQX201，上海欣軟

• 實(shí)驗(yàn)原理：通過懸掛小鼠尾部，使其處于倒懸的應(yīng)激體位。小鼠初期會(huì)劇烈掙扎以試圖恢復(fù)正常體位，在掙扎無果后，會(huì)轉(zhuǎn)變?yōu)殚g斷性的不動(dòng)狀態(tài)，即“絕望”表現(xiàn)。

• 操作步驟：

1. 使用醫(yī)用膠帶將小鼠尾部固定于懸尾梁或磁鐵棒上，使其頭部向下倒懸，并確保小鼠無法接觸箱底。

2. 動(dòng)物適應(yīng)2分鐘后，開始記錄。總實(shí)驗(yàn)時(shí)長(zhǎng)為6分鐘，統(tǒng)計(jì)后4分鐘內(nèi)動(dòng)物的不動(dòng)時(shí)間。同樣，多只動(dòng)物同時(shí)實(shí)驗(yàn)時(shí)需用擋板隔離視線。

評(píng)價(jià)指標(biāo)：主要記錄不動(dòng)時(shí)間和掙扎時(shí)間。動(dòng)物停止掙扎，身體保持靜止倒懸的時(shí)間越長(zhǎng)，提示抑郁樣行為越重。不同品系小鼠（如C57BL/6與ICR）的基礎(chǔ)不動(dòng)時(shí)間存在差異，需根據(jù)相應(yīng)背景的對(duì)照組進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)比較。

4. 實(shí)驗(yàn)順序選擇原則
在進(jìn)行多維度抑郁行為評(píng)估時(shí)，實(shí)驗(yàn)順序的安排至關(guān)重要。主要原則是依據(jù)實(shí)驗(yàn)的應(yīng)激強(qiáng)度，優(yōu)先進(jìn)行應(yīng)激程度最小的檢測(cè)。

• 推薦順序：首先進(jìn)行糖水偏好實(shí)驗(yàn)，該過程對(duì)動(dòng)物干擾小。之后間隔至少一天，再依次或間隔進(jìn)行強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)和懸尾實(shí)驗(yàn)。必須注意，強(qiáng)迫游泳和懸尾這兩種高強(qiáng)度應(yīng)激實(shí)驗(yàn)不能安排在同一天，兩者之間至少間隔24小時(shí)。

• 數(shù)據(jù)一致性：研究表明，只要確定了合適的順序并保持所有實(shí)驗(yàn)批次的一致性，無論先進(jìn)行強(qiáng)迫游泳還是懸尾實(shí)驗(yàn)，均可獲得可靠的數(shù)據(jù)。例如，進(jìn)行高強(qiáng)度應(yīng)激實(shí)驗(yàn)的當(dāng)天，也可以同時(shí)進(jìn)行糖水偏好實(shí)驗(yàn)的適應(yīng)過程，兩者互不干擾。關(guān)鍵在于所有批次的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)均應(yīng)遵循同一套標(biāo)準(zhǔn)化流程，以確保結(jié)果的可比性和可重復(fù)性。

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