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表達(dá)穩(wěn)轉(zhuǎn)株的常見(jiàn)分類與應(yīng)用解析

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表達(dá)穩(wěn)定細(xì)胞株(Expression Stable Cell Lines)是指通過(guò)基因工程手段,將特定基因序列整合到宿主細(xì)胞染色體上,使目的基因能夠在宿主細(xì)胞內(nèi)長(zhǎng)期且穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞模型。

主要分類

組成型報(bào)告基因穩(wěn)定細(xì)胞系

原理:通過(guò)引入熒光蛋白(如GFP、RFP、YFP、mCherry)或luciferase等報(bào)告基因到細(xì)胞基因組中,并利用CMV、EF1a等組成型啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)報(bào)告基因持續(xù)穩(wěn)定表達(dá)。

應(yīng)用:細(xì)胞定位示蹤、體內(nèi)/外成像、藥物篩選等領(lǐng)域。

吉滿服務(wù)

吉滿生物具備特有的熒光素酶報(bào)告基因系統(tǒng),并基于藥物作用機(jī)制(MOA)構(gòu)建出的螢火蟲(chóng)熒光素酶(Firely luciferase)報(bào)告基因細(xì)胞系產(chǎn)品具有靈敏度高、穩(wěn)定性好、操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn),助力研究人員對(duì)小分子藥物、單抗、雙抗等藥物的體外生物學(xué)活性評(píng)價(jià)。

信號(hào)通路元件穩(wěn)定細(xì)胞系

原理:通過(guò)將信號(hào)通路相關(guān)元件(如信號(hào)受體、轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件、啟動(dòng)子等)穩(wěn)定整合到細(xì)胞中,以監(jiān)測(cè)和研究特定信號(hào)通路的活性和調(diào)控。

應(yīng)用:常見(jiàn)的信號(hào)通路有NFkB, STAT, AP1, NFAT等,這些信號(hào)通路與多種疾病的發(fā)生和治療有關(guān),因此與其相關(guān)的穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞系在基礎(chǔ)科研與藥物篩選中起著重要的作用。

吉滿服務(wù)

吉滿生物能夠?yàn)榭蛻魳?gòu)建高質(zhì)量的穩(wěn)定細(xì)胞系,產(chǎn)品涵蓋NF-B、NFAT、AP1、CRE、IL2-promoter、STATs、SMAD等重要信號(hào)通路元件?;趌uciferase報(bào)告基因,有力支持信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路研究、配體結(jié)合特性分析、靶點(diǎn)藥物開(kāi)發(fā)以及基因功能探索等多個(gè)領(lǐng)域。

腫瘤特異性抗原表達(dá)穩(wěn)定細(xì)胞系

原理:腫瘤組織本身是多種細(xì)胞的混合體,基因表達(dá)雜亂無(wú)章。通過(guò)構(gòu)建過(guò)表達(dá)穩(wěn)定細(xì)胞系,研究人員可以在純凈的背景下,研究目標(biāo)基因如何影響腫瘤細(xì)胞的增殖、遷移、侵襲、死亡等惡性行為及相關(guān)信號(hào)通路。同時(shí),這種表達(dá)特定腫瘤抗原的穩(wěn)定細(xì)胞系還可用于驗(yàn)證該抗原作為預(yù)后指標(biāo)或治療靶點(diǎn)的可行性。

穩(wěn)定表達(dá)特定腫瘤抗原的工程細(xì)胞系構(gòu)建及應(yīng)用



應(yīng)用:不僅適用于高通量篩選和評(píng)估靶向藥物的體外生物學(xué)活性,還能有效評(píng)價(jià)CAR-T細(xì)胞、TCR-T細(xì)胞等免疫細(xì)胞的殺傷活性和特異性。此外,該細(xì)胞系也為研究腫瘤細(xì)胞與周圍細(xì)胞(如成纖維細(xì)胞)之間的相互作用提供了有力工具。

吉滿服務(wù)

吉滿生物可為抗腫瘤藥物的研發(fā)提供了穩(wěn)定細(xì)胞系這一關(guān)鍵工具 ,產(chǎn)品覆蓋EGFR、STEAP1、VEGF、PD1-PDL1等重要的腫瘤相關(guān)靶點(diǎn),全面支持相關(guān)藥物的體外活性驗(yàn)證,助力推動(dòng)腫瘤免疫治療研究與發(fā)展。

激酶穩(wěn)定細(xì)胞系

在激酶研究中,構(gòu)建能穩(wěn)定表達(dá)特定激酶(包括野生型或疾病相關(guān)突變型)的細(xì)胞系,是破解激酶功能、開(kāi)發(fā)靶向藥物的核心實(shí)驗(yàn)策略。這類細(xì)胞系為在均一細(xì)胞背景下研究特定激酶的生物學(xué)功能、進(jìn)行高通量藥物篩選以及評(píng)估耐藥機(jī)制提供了關(guān)鍵且可靠的工具。

吉滿服務(wù)

吉滿生物可提供覆蓋眾多重要激酶靶點(diǎn)(如EGFR、KRAS、INSR、c-Kit:SCF、BTK、MUSK等)的穩(wěn)定細(xì)胞系產(chǎn)品與服務(wù)。這些細(xì)胞系采用優(yōu)化的表達(dá)系統(tǒng),確保激酶能夠穩(wěn)定、高效地表達(dá),并保持良好的生物學(xué)活性,可直接用于激酶抑制劑的劑量反應(yīng)曲線測(cè)定和體外藥效學(xué)評(píng)價(jià),為激酶靶向藥物的研發(fā)提供關(guān)鍵工具。

免疫相關(guān)細(xì)胞系

原理:通過(guò)基因工程技術(shù),將特定的免疫分子(如免疫檢查點(diǎn)蛋白、細(xì)胞因子受體、抗原提呈相關(guān)分子等)穩(wěn)定整合到宿主細(xì)胞基因組中,使細(xì)胞能夠持續(xù)表達(dá)這些功能蛋白。



癌癥治療中的免疫檢查點(diǎn)及其抑制劑圖源doi: 10.2147/BCTT.S175360



癌癥治療中的免疫檢查點(diǎn)及其抑制劑

應(yīng)用:為研究免疫應(yīng)答的啟動(dòng)、調(diào)控機(jī)制以及進(jìn)行免疫藥物篩選提供理想的實(shí)驗(yàn)?zāi)P汀?/p>

吉滿服務(wù)

吉滿生物可提供上百種免疫相關(guān)穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建服務(wù),涵蓋共刺激/抑制分子(如B7/CD28家族、TNF受體家族、PD-1、CTLA-4等)、免疫檢查點(diǎn)、模式識(shí)別受體、細(xì)胞因子及其受體等多個(gè)重要免疫靶點(diǎn)家族。可直接用于免疫調(diào)節(jié)機(jī)制研究、免疫藥物活性評(píng)價(jià)以及免疫逃逸機(jī)制解析等實(shí)驗(yàn)。

風(fēng)險(xiǎn)提示:細(xì)胞授權(quán)合規(guī)性不可忽視

使用未經(jīng)授權(quán)或來(lái)源不明的的細(xì)胞系進(jìn)行實(shí)驗(yàn),不僅可能涉及知識(shí)產(chǎn)權(quán)風(fēng)險(xiǎn),還可能因細(xì)胞系的遺傳背景不明確、存在潛在污染等問(wèn)題,影響研究結(jié)果的準(zhǔn)確可靠與否。

在生物藥研發(fā)領(lǐng)域,國(guó)內(nèi)外藥品監(jiān)管機(jī)構(gòu)在受理新藥臨床試驗(yàn)申請(qǐng)(IND)和生物制品許可申請(qǐng)(BLA)時(shí),要求對(duì)用于藥物活性測(cè)定、毒理學(xué)研究、質(zhì)量控制(QC)放行等關(guān)鍵環(huán)節(jié)的細(xì)胞株,提供清晰的來(lái)源證明和合法的商業(yè)化授權(quán)文件,非授權(quán)或來(lái)源不明的細(xì)胞則無(wú)法提供要求文件,可能導(dǎo)致申報(bào)資料被拒絕。

因此,建議在選購(gòu)或定制過(guò)表達(dá)穩(wěn)定細(xì)胞株時(shí),優(yōu)先選擇能夠提供清晰、完整的細(xì)胞株溯源文件以及合法商業(yè)化授權(quán)證明的供應(yīng)商。



客戶定制案例



使用吉滿生物構(gòu)建的CCR2-RFP過(guò)表達(dá)細(xì)胞系轉(zhuǎn)染HEK293T細(xì)胞,經(jīng)WB驗(yàn)證,目的基因表達(dá)極顯著上調(diào);亞細(xì)胞定位結(jié)果顯示其位于細(xì)胞膜上。(Advanced Science, 2024, 11(24): e2306675. IF=14.299,Q1)



吉滿生物構(gòu)建目的基因dcas9-SAM胃癌細(xì)胞A(左)和胃癌細(xì)胞B(右),經(jīng)RT-qPCR驗(yàn)證:目的基因上調(diào)倍數(shù)分別達(dá)20和30倍以上。



使用吉滿生物構(gòu)建的MGC-803 PCSK9過(guò)表達(dá)細(xì)胞系,經(jīng)WB驗(yàn)證,目的基因表達(dá)量極顯著上調(diào)。

吉滿服務(wù)



細(xì)胞授權(quán)合規(guī)性保障

吉滿生物已獲得HEK293、Jurkat、CHO-K1細(xì)胞商業(yè)化使用授權(quán)及HEK293中國(guó)內(nèi)地定向用途獨(dú)家分授權(quán)代理資格,可提供合規(guī)性授權(quán)解決方案。為客戶早期研發(fā)到產(chǎn)品上市保駕護(hù)航。

專業(yè)技術(shù)平臺(tái)一站式服務(wù)

依托成熟的慢病毒包裝平臺(tái)與基因編輯技術(shù),吉滿生物現(xiàn)已布局近400個(gè)靶點(diǎn),擁有近1500株現(xiàn)貨單克隆細(xì)胞株資源。可針對(duì)客戶需求定制多種過(guò)表達(dá)穩(wěn)定細(xì)胞系,覆蓋肝癌、肺癌、白血病、等關(guān)鍵靶點(diǎn)。

技術(shù)團(tuán)隊(duì)深耕科研服務(wù)領(lǐng)域十四年,擅長(zhǎng)不同基因及細(xì)胞系的構(gòu)建項(xiàng)目,從項(xiàng)目咨詢到售后支持,均提供專業(yè)的技術(shù)指導(dǎo),解決客戶在細(xì)胞培養(yǎng)和使用過(guò)程中遇到的各種問(wèn)題。

嚴(yán)格質(zhì)量控制

遵循ISO9001認(rèn)證的質(zhì)量體系和嚴(yán)格的病毒純化工藝,從載體構(gòu)建到單克隆篩選,每個(gè)環(huán)節(jié)都實(shí)施嚴(yán)格的質(zhì)量控制,確保交付的細(xì)胞株性能穩(wěn)定可靠。

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