研究結(jié)果表明，三七提取物有助于增強(qiáng)免疫反應(yīng)，同時(shí)通過調(diào)節(jié)南美白對蝦腸道消化酶的活性來維持生長性能。

三七屬于五加科三七屬 ，是臨床常用的中藥材，對水產(chǎn)動(dòng)物具有促進(jìn)生長、免疫調(diào)節(jié)、抗菌等作用，具有提高生長速度、提高免疫力、增強(qiáng)抗病能力的作用。三七中已鑒定出皂苷、聚乙炔、甾醇、黃酮、多糖、環(huán)肽、氨基酸等200多種活性成分 。先前的研究表明，三七提取物可增強(qiáng)雜交石斑魚的生長和抗氧化能力。

血細(xì)胞在蝦的免疫系統(tǒng)中發(fā)揮著關(guān)鍵作用，執(zhí)行吞噬、儲存和釋放酚氧化酶原（proPO）等功能。酚氧化酶 (PO) 主要由 proPO 系統(tǒng)激活，產(chǎn)生具有殺菌特性的黑色素，促進(jìn)外部傷口愈合并抵御病原體。在吞噬作用過程中，會產(chǎn)生活性氧（ROS），引起呼吸爆發(fā)（RB），從而促進(jìn)吞噬作用和異物清除。此外，胰蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、糜蛋白酶等消化酶是蝦腸道內(nèi)消化和營養(yǎng)吸收的重要指標(biāo)。這是影響蝦的生長和抵抗力的重要因素。

該研究評估了三七提取物 （PNWE）對白對蝦免疫反應(yīng)和消化酶功能的影響。此外，該研究還評估了腸道消化酶的活性和弧菌數(shù)量， 并觀察了肝胰腺和腸道的組織病理學(xué)。

一、研究方法：

平均重量為3.8±0.5g（平均值±SD）的白對蝦培養(yǎng)7天，飼喂體重8%的商業(yè)飼料（35% 粗蛋白），每天飼喂兩次。實(shí)驗(yàn)過程中，實(shí)驗(yàn)蝦（60尾/組）在裝有200L海水、鹽度為15‰的水槽中飼養(yǎng)；溫度24-26°C，pH值7.8-8。

將三七粉末加入無菌水(100g/L)中并在室溫下攪拌24小時(shí)，然后將混合物離心。收集上清液并通過0.45μm濾膜過濾。濾液蒸發(fā)并隨后冷凍干燥產(chǎn)生PNWE，產(chǎn)率51.94%。 PNWE樣品儲存于-80°C。

實(shí)驗(yàn)組蝦注射不同濃度的三七提取物（PNWE）（50、100和200μg/g蝦）。約20μL PNWE，濃度9.5；將19或38mg/mL注射到白蝦的第二或第三腹節(jié)中，分別達(dá)到50、100和200μg/g體重的劑量。對照組給蝦注射鹽水（20μL）。在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)（12、24、48、72、168和240 h），每組采集10尾蝦，分析免疫參數(shù)（THC、SGC、GC、HC、PO和RB、PR和PI活性）和腸道消化酶（包括胰蛋白酶、糜蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶）活性以及腸道內(nèi)弧菌數(shù)量。 240小時(shí)后取肝胰腺和腸道樣本進(jìn)行組織病理學(xué)觀察。

二、研究成果

根據(jù)顯微鏡觀察結(jié)果，注射不同濃度PNWE的蝦的GC、SGC和HC在240小時(shí)內(nèi)均未觀察到變形或破損。 24-72小時(shí)后，注射100和200μg PNWE的蝦的THC明顯高于對照（p < 0.05）；從24-240小時(shí)，注射不同PNWE濃度的蝦的GC和SGC百分比明顯高于對照組（p < 0.05），而HC百分比明顯低于對照組（p < 0.05）。在注射100和200μg PNWE 的蝦中觀察到GC比率增加最多（圖1）。

12-240小時(shí)，不同濃度PNWE注射組的吞噬活性（RB）均明顯高于對照組。注射100和200μg PNWE 12-48小時(shí)后，蝦的RB最高。注射不同濃度PNWE的蝦在12至240小時(shí)內(nèi)的PR和PI均明顯高于對照組。注射100和200 μg PNWE 的組中PI最高。從12-240小時(shí)，注射不同濃度PNWE的蝦的PO活性明顯高于對照組（圖2）。

注射PNWE的蝦的胰蛋白酶活性高于對照組蝦(p<0.05)，其中50和100μg/g蝦組在12-48小時(shí)內(nèi)具有最高活性。 12-24小時(shí)，注射PNWE的蝦胰凝乳蛋白酶活性明顯高于對照組，其中50μg/g蝦組最高。從12-24小時(shí)，注射PNWE的蝦的淀粉酶活性明顯高于對照組(p<0.05)，其中50μg PNWE在12小時(shí)時(shí)最高。從12-24小時(shí)，注射50μg PNWE的蝦的脂肪酶活性顯著高于對照（p<0.05）。

48小時(shí)后，注射100和200 μg/g PNWE蝦的腸道內(nèi)弧菌數(shù)量明顯低于對照組（p < 0.05）。

三、結(jié)論：

三七提取物通過增加HC、PO、RB和吞噬細(xì)胞活性來增強(qiáng)白蝦的免疫反應(yīng)，同時(shí)通過調(diào)節(jié)腸道消化酶（胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶）的活性來維持生長性能。 PNWE是一種很有前景的蝦類免疫調(diào)節(jié)劑，有潛力促進(jìn)未來水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。