近日，華中科技大學同濟醫(yī)學院附屬同濟醫(yī)院陳孝平/陳倩/趙健萍/梁慧芳/袁月團隊 在國際期刊Gut發(fā)表了題為：ISG15 deficiency in hepatic stellate cells promotes TGFβ2-induced liver fibrosis by counteracting CREB1 ISGylation的 研究，該研究聚焦于干擾素刺激基因 15 （ ISG15 ）在肝纖維化中的作用。作者首先發(fā)現(xiàn)ISG15在纖維化肝組織和激活的肝星狀細胞（ HSC ）中顯著下調(diào)。通過構(gòu)建HSC特異性ISG15缺失小鼠，證實ISG15缺失不僅自發(fā)引起肝纖維化，還加劇CCl4、膽管結(jié)扎及MASH飲食誘導的纖維化。機制上，ISG15通過ISGylation修飾轉(zhuǎn)錄因子CREB1的Lys-304/305位點，抑制其活性，從而阻斷CREB1與TGFβ2啟動子的結(jié)合，減少TGFβ2/SMAD2信號通路的激活。體外和體內(nèi)實驗表明，恢復ISG15表達或使用CREB1抑制劑666-15均可顯著減輕纖維化程度。綜上，ISG15-CREB1-TGFβ2軸為肝纖維化的潛在治療靶點。

干擾素（ IFN ）刺激的基因 15 （ ISG15 ）是 I 型 IFN （ IFN-I ）途徑的關(guān)鍵下游效應(yīng)器，也是第一個被鑒定的泛素樣蛋白，主要通過 ISGylation 發(fā)揮作用， ISGylation 是一種翻譯后修飾過程，涉及通過羧基末端 LRLRGG 基序與底物賴氨酸殘基共價結(jié)合。新出現(xiàn)的證據(jù)表明， ISG15 與組織纖維化有關(guān)，過度的 ISGylation 會加劇血管緊張素 II 誘導的心臟纖維化，加速急性腎損傷。在肝臟環(huán)境中， ISGylation 通過修飾肝細胞或 HSC 介質(zhì)如 p53 和β -catenin 來調(diào)節(jié)肝損傷反應(yīng)。肝臟病毒感染，主要是乙型肝炎和丙型肝炎病毒感染，與 ISG15 表達相關(guān)。盡管取得了這些進展，但 ISG15/ ISGylration 在肝纖維化發(fā)生中的作用仍未得到探索。

研究團隊首先通過臨床樣本與動物模型發(fā)現(xiàn)， ISG15 在纖維化肝臟的激活 HSCs 中呈低表達狀態(tài)，且與 HSCs 激活標志物α - 平滑肌肌動蛋白（α SMA ）表達負相關(guān)（人類肝硬化樣本中 R=-0.44 ， p<0.05 ）。進一步機制探索顯示， I 型干擾素通路轉(zhuǎn)錄因子 IRF9 下調(diào)，是導致纖維化時 HSCs 中 ISG15 表達減少的上游原因。 為明確 ISG15 功能，團隊構(gòu)建 HSC 特異性 ISG15 敲除小鼠（ ISG15cKO ）。結(jié)果顯示， 18 月齡 ISG15cKO 小鼠出現(xiàn)自發(fā)性肝纖維化，肝臟羥脯氨酸（膠原標志物）及α SMA 、 Col1 α 1 （細胞外基質(zhì)標志物）表達顯著升高；在四氯化碳（ CCl4 ）、膽管結(jié)扎（ BDL ）等實驗性肝纖維化模型中， ISG15cKO 小鼠肝損傷、膠原沉積及炎癥浸潤程度均顯著重于野生型小鼠，證實 HSC 中 ISG15 缺失可直接促進肝纖維化。 體外實驗進一步驗證， ISG15 主要通過細胞內(nèi) ISGylation 發(fā)揮作用：敲除 ISG15 或下調(diào) ISGylation 關(guān)鍵酶（如 UBE2L6 ），會促進 HSCs 增殖、激活及細胞外基質(zhì)產(chǎn)生；反之增強 ISGylation （干擾 USP18 ）則抑制上述過程。 機制研究取得關(guān)鍵突破：通過蛋白質(zhì)組學、免疫沉淀等技術(shù) ，團隊發(fā)現(xiàn) ISG15 可通過 C 端雙甘氨酸直接結(jié)合 CREB1 的 Lys-304/305 位點并進行 ISGylation 修飾，抑制 CREB1 磷酸化及其核轉(zhuǎn)位，進而減少 CREB1 與 TGF β 2 啟動子結(jié)合，最終抑制 TGF β 2/SMAD2 信號通路 - 該通路是驅(qū)動 HSCs 激活與肝纖維化的核心通路。 治療潛力驗證顯示，通過 HSC 特異性 AAV 恢復 ISG15 表達，或使用 CREB1 抑制劑 666-15 （ 5mg/kg ，每周 2 次腹腔注射），均可顯著減輕 ISG15 缺失誘導的小鼠肝纖維化，且 666-15 在人類肝硬化樣本中也被證實與纖維化程度相關(guān)，提示其臨床轉(zhuǎn)化價值。 該研究不僅闡明 ISG15-CREB1-TGF β 2 軸這一肝纖維化新調(diào)控通路，還為肝纖維化治療提供了“靶向 CREB1 ”的新策略，有望推動相關(guān)療法研發(fā)。

原文鏈接：https://gut.bmj.com/content/early/2025/08/17/gutjnl-2025-335327.long#block-system-main

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